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玉米叶绿素含量的测定

来源: 更新时间:2012-06-29 阅览2431次

      叶绿素是植物叶片光合作用的主要光合色素,必不可少。叶绿素含量的测定是实验室的重要项目之一,如采用化学方法Arnon法,分光光度计法,叶绿素测量仪等,不一而足。迄今为止,在实际应用中,大家通常采用叶绿素测量仪,因为其方便快捷,而且精确度高,方便携带。受到广泛农业工编辑、科研院所的青睐。
      分光光度计法测定结果准确可靠,但是在测定时需要损伤叶片和组织,不利于对植株的系统研究。叶色值反映了植物叶片的绿色程度,与叶绿素含量存在一定的相关性。叶绿素测量仪是一种专门用于测定植物叶绿素含量的仪器,该仪器有多家厂商生产销售,其中以日本柯尼卡美能达企业的SPAD-502最为高端和畅销。托普仪器作为日本柯尼卡美能达企业的特约一级代理商,也提供叶绿素测量仪的销售工作。叶绿素测量仪的测定原理是:测量叶子在红色区域和近红外区域的吸取率。通过这两部分区域的吸取率,来计算出一种SPAD值,它是用数字来表示目前和叶子中叶绿素含量相对应的参数。因为叶绿素在蓝色区域(400—500nm)和红色区域(600—700nm)范围内吸取达到了峰值,但在近红外区域却没有吸取。另外,叶绿素测量仪还具有反应氮元素含量的作用。
      玉米叶绿素含量的测定有两种方法。叶绿素计法:利用日本产的SPAD-502叶绿素测量仪于花期对玉米功能叶片中部进行活体测定。每个材料取3个叶片,最后求平均值。分光光度计法:将叶绿素计法测定完的叶片取回进行分光光度计法测定。用毛刷刷去表面杂质,用水冲洗,擦干,备用。每个叶片在中部用直径9 mm打孔器打孔,取6个圆形叶片,称重后放于15 mL试管,用10 mL95%乙醇避光浸泡96 h,浸泡过程中每天混匀2次,叶片完全变白后进行比色,于665、649、470 nm波长测量光密度值,计算叶绿素含量,取3个叶片的平均值作为该材料的含量值。计算公式为:CA=13.95D665-6.88D649;CB=24.96D649-7.32D665;C其它=(1000D470-2.05CA-114.8CB)/245
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