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灵芝孢子与肿瘤细胞端粒酶活性的关系

来源:/ 更新时间:2013-01-15 阅览4297次

      灵芝,作为一种中药材,是一种很好的养品,传言其对肿瘤有很好的抑制作用,科研人员对其的研究也逐步的加深,有分析说孢子对肿瘤中的一种酶起到抑制作用,下面大家看看灵芝孢子对肿瘤细胞端粒酶活性的影响。
1 材料和方法
1.1 材料来源
      人肝癌细胞、人肺癌细胞、人白血病细胞、Lewis肺癌细胞株,肺成纤维母细胞。灵芝孢子利用孢子捕捉器捕捉。
1.2 细胞培养
      将上述细胞加入RPMI1640培养液,调整细胞数为2×109/L,分成2份,每份2mL.1份加入0.1mL生理盐水作为阴性对照,另1份加入40g/L的灵芝孢子0.1mL,在37℃,体积分数为0.05的CO2条件下培养6d。
1.3 端粒酶提取
      调整细胞数为1×109/L,4℃,以1500r/min离心5min,弃去上清液,PBS清洗,离心(1500r/min,5min),弃上清液,加250μL裂解液,冰浴30min,40℃,15000r/min离心15min,取上清液移于焦碳酸二乙酯处理过的试管中,备用。
1.4 端粒酶活性的检测
      活性检测采用比较聚合酶链反应-酶免法(PCR-ELISA)。使用酶标仪测定450,690nm处吸光度(A), 端粒酶活性与吸光度呈正比。
2 结  果

表1 灵芝孢子对肿瘤细胞端粒酶活性的影响
      灵芝孢子对各种肿瘤细胞端粒酶活性作用结果见表1。本文结果表明,孢子捕捉仪捕获的灵芝孢子组SMMC-7721,H460,K562,Lewis肺癌细胞株端粒酶活性均较对照组降低,差异有极显著意义(t=2.37~4.21,P<0.05,0.01),IMR90端粒酶活性与对照组比较无明显差异(t=0.36,P>0.05)。
3 讨  论
      端粒及端粒酶是生命科学研究的热点之一。端粒酶是核糖核酸和蛋白质的复合物,是一种特殊的DNA聚合酶,利用自身的一段RNA作模板,合成端粒的DNA到染色体末端。端粒酶被激活,细胞将永生和恶变。本文结果显示,除IMR90外,其他肿瘤细胞有较强的端粒酶表达。灵芝孢子可明显抑制肿瘤细胞端粒酶的活性,而IMR90端粒酶表达阴性,加入灵芝孢子活性无变化。由此可见,灵芝孢子抗肿瘤作用是通过抑制端粒酶的活性来实现的。在肿瘤细胞系中可检测出端粒酶的活性,而普通的体细胞内没有端粒酶的表达。体细胞发生恶变可能是由于端粒酶的激活所致,因此,抑制端粒酶的活性,可有效地抑制肿瘤细胞的生长。端粒酶作为肿瘤标志物和治疗靶点日益受到重视,灵芝孢子对端粒酶具有抑制作用,为抗肿瘤中药的临床应用提供了新的理论依据。

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